Автореферат и диссертация по ветеринарии (16.00.03) на тему: Бабезиоз собак в условиях Московской области
Автореферат диссертации по ветеринарии на тему Бабезиоз собак в условиях Московской области
На правах рукописи
Кошелева Марина Игоревна
Бабезиоз собак в условиях Московской области (эпизоотология, иммунитет, терапия)
16.00.03 - ветеринарная микробиология, вирусология,
эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология 03.00.19 - паразитология
диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук
Работа выполнена на кафедре ветеринарной патологии аграрного факультета Российского университета дружбы народов.
кандидат биологических наук, доцент И.А. Молчанов
доктор ветеринарных наук, профессор Б.А. Тимофеев кандидат ветеринарных наук, доцент Д.Н. Шемяков
НИИ пушного звероводства и кролиководства
Защита состоится 14 декабря 2006 г. в 12-00 часов на заседании диссертационного совета К 212.203.02 в Российском университете дружбы народов по адресу: 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д. 8, корп.2, аграрный факультет.
Адрес электронной почты: у.у. makarov@agro.pfu.edu.ru
С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Российского университета дружбы народов по адресу: 117198, Москва, ул. Миклухо-Маклая, д.6.
Автореферат разослан 13 ноября 2006 г.
Ученый секретарь диссертационного совет кандидат сельскохозяйственных наук, доцент
1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.
Актуальность темы. Несмотря на то, что бабезиозы сельскохозяйственных животных в целом достаточно хорошо изучены, разработана диагностика, терапия и профилактика этой инвазии, остаётся ещё много слабо детализированных проблем, касающихся бабезиоза плотоядных. Слабо изучены вопросы регионального распространения бабезиоза, восприимчивость животных в зависимости от возраста, пола и породы, естественная резистентность и иммунный статус у больных и переболевших животных, недостаточно разработана специфическая и симптоматическая терапия, иммунопрофилактика, реабилитация переболевших животных.
Согласно статистическим данным (Р.М.Рыщанова, 2000, P.Conrad et al., 2001, Г.А.Послов и др., 2006) за последние 10 лет заболеваемость собак бабезиозом увеличилась в несколько раз. В определённой степени это связано с увеличением миграции населения (развитием туризма, пригородного садоводства), в результате чего увеличился ареал клещей, что привело к новым очагам инвазии. Кроме того, с тех пор как прекратились обработки лесных массивов пестицидами, размножение клещей практически не регулируется, их популяция постоянно растёт. В последнее десятилетие в населённых пунктах, особенно в городах, резко возросло количество собак, а отсутствие специальных выгульных площадок привело к тому, что увеличилась их плотность в лесопарковых зонах городов, что не могло не найти отражение в эпизоотической ситуации по бабезиозу.
Непрерывный и неконтролируемый рост численности собак, отсутствие эффективных средств профилактики болезни, антисанитарное состояние выгулов способствовало тому, что течение болезни становилось всё более тяжёлым и нередко заканчивалось гибелью животных. Все эти факторы позволяют предположить влияние городской среды на формирование урбанизированных очагов данной инвазии.
Особенно возросла актуальность исследования данной группы протозоозов в связи с участившимися сообщениями о заболевании людей бабезиозом (С.В.Новгородцева, 1999, Э.И.Коренберг, 2002).
Цели и задачи исследования. Целью исследований явилось изучение современных особенностей бабезиоза, в частности уточнение эпизоотологии, иммунитета и лечения. Исходя из этого, были поставлены следующие задачи:
• изучить особенности эпизоотологии бабезиоза в условиях Московской области (динамику заболеваемости собак бабезиозом за последние годы, сезонную, возрастную и породную особенность заражения собак Babesia canis, данные региональной иксодофауны),
• определить морфологические особенности Babesia canis (размеры, форму, интенсивность инвазии),
• изучить гематологические, биохимические показатели крови и мочи, а также факторы неспецифической резистентности при разной степени тяжести течения болезни (колебания гемоглобина, количества эритроцитов и лейкоцитов, состояние фагоцитарной активности клеток крови, уровни IgG и титры интерферона),
• провести сравнительный анализ лечебно-реабилитационной и профилактической эффективности беренила и верибена при разной степени тяжести течения бабезиоза у собак. Научная новизна. Научная новизна работы заключается в установлении эпизоотического состояния по бабезиозу собак и иксодофауне в отдельных зонах Московской области, в определении сезонных, породных и возрастных особенностей заболеваемости собак бабезиозом с учётом популяционного состава животных, а также в изучении морфометрических особенностей Babesia cams в зависимости от тяжести течения заболевания. Впервые установлена корреляция гематологических показателей, фагоцитарной активности нейтрофилов, концентрации IgG и тяжести течения заболевания.
Практическое значение. На основании полученных результатов исследования подтверждено и доказано, что эпизоотический процесс при бабезиозе в изучаемом регионе - процесс управляемый. Определены и апробированы наиболее эффективные лечебно-реабилитационные способы и средства широкого спектра действия и целесообразность применения пестицидов для борьбы с иксодовыми клещами в регионе. Положения, выносимые на защиту:
• территориальные и популяционные границы эпизоотического процесса при бабезиозе собак в изучаемом регионе,
• морфометрические особенности Babesia cartis при разной степени тяжести течения заболевания,
• изменение факторов неспецифической резистентности (фагоцитарной активности нейтрофилов, концентрации IgG и титров интерферона), гематологических и биохимических показателей в зависимости от тяжести течения бабезиоза,
• сравнительная эффективность верибена и беренила при разной степени заболевания собак бабезиозом.
Апробация работы и публикация результатов исследований.
Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на ежегодных научных конференциях студентов, аспирантов, молодых учёных и сотрудников аграрного факультета кафедры ветеринарной патологии Российского университета дружбы народов (2001-2005г.г.), на первой международной юбилейной конференции, посвящённой 110-летию со дня открытия К.И.Виноградовым сибирской двуустки у человека (Томск, 2001), на Международной научно-практической паразитологической конференции, посвящённой 110-летию со дня рождения профессора А.А.Маркова (Москва, 2002).
По материалам диссертационной работы опубликовано 6 научных работ, в том числе статьи в журналах «Ветеринария», «Вестник РУДН», «Вестник ветеринарной медицины», «Ветеринарная патология».
Объём и структура диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, результатов исследований, их
обсуждения, выводов, практических предложений. Список использованной литературы включает 193 источника, в том числе 44 иностранных. Работа иллюстрирована 13 таблицами, 2 схемами и 13 рисунками.
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ 2.1 Материалы и методы исследования
Настоящая работа проводилась в 2000-2006 гг. на кафедре ветеринарной патологии аграрного факультета РУДН, а также в условиях клинико-диагностической лаборатории Апрелевской ветеринарной лечебницы и Наро-Фоминской станции по борьбе с болезнями животных.
Эпизоотологические исследования бабезиоза. Изучение эпизоотологии, гематологических показателей, а также лечебно-профилактические мероприятия проводили на 1942 собаках, больных бабезиозом, принадлежавших частным владельцам г. Москвы и Московской области. Возраст животных колебался от 2 месяцев до 15 лет. Постановку окончательного диагноза на бабезиоз у поступающих на приём животных проводили по результатам исследования мазков крови, окрашенных по Романовскому, а также используя Яеазгат® Квик-Диф набор.
Сбор клещей осуществляли с момента открытия дачного сезона, с апреля по октябрь-ноябрь, обследование производилось на 2198 собаках, принадлежащих частным владельцам.
Статистические данные, характеризующие эпизоотологию бабезиоза, получали в собственных исследованиях.
Изучение морфометрических признаков бабезий. Исследование проводили в мазках крови 79 собак, больных бабезиозом разной степени тяжести, возраст которых был от 6 месяцев до 14 лет. Согласно рекомендациям А.И.Ятусевича и В.Т.Заблоцкого (1995), во внимание принимали следующие морфологические признаки: величину (больше, меньше или равны радиусу эритроцита), внутриклеточное расположение (на периферии или в центре эритроцита), количество паразитов в одном эритроците, угол соединения парно-грушевидных форм, наличие типичных (диагностических) форм, процент поражения эритроцитов.
Исследования крови и мочи. Изучение количественного и качественного состава крови животных проводили общепринятыми в клинической гематологии методами у 79 больных и 10 здоровых собак (контроль) в возрасте от 6 месяцев до 14 лет.
На основании интенсивности инвазии всех больных собак разделили на 3 группы по степени тяжести заболевания:
• средняя - паразитемия 1-3% , основные клинические симптомы: Т 40,1±0,5°С, анорексия, слабость, гемоглобинурия, тахикардия, снижение отправления физиологических функций,
• тяжёлая - паразитемия >3%, основные клинические симптомы: Т 40,9±0,3°С, анорексия, затруднённое дыхание, тахикардия, гемоглобинурия, желтуха, слабость задних конечностей, снижение отправления основных физиологических функций.
Общий анализ мочи проводили с использованием диагностической тест-системы «Combur -Test®» по следующим показателям: рН, белок, глюкоза, кетоновые тела, уробилиноген, билирубин, кровь, гемоглобин.
Определение факторов неспецифической резистентности.
Фагоцитарная активность нейтрофилов. Изучение указанной способности нейтрофилов крови проводили на 20 собак разных пород на модели поглощения частиц полистирольного латекса диаметром 1,7 мкм по методу И.С.Фрейдлина и соавт. (1976) в модификации ЛЛ.Эберта и соавт. (1983). С помощью иммерсионной микроскопии активность фагоцитоза оценивали по следующим показателям: фагоцитарный индекс - количество фагоцитирующих латекс нейтрофилов в % от общего числа, фагоцитарное число - количество поглощённых за определённое время частиц латекса в расчёте на 1 нейтрофил, коэффициент фагоцитарного числа - отношение общего количества нейтрофилов к количеству фагоцитировавших клеток.
Определение количества иммуноглобулинов в сыворотке собак, больных бабезиозом. Концентрацию сывороточных иммуноглобулинов (IgG) у 79 больных и 10 здоровых (контроль) собак в возрасте от 6 месяцев до 14 лет определяли методом радиальной иммунодиффузии в геле по G.Mancini et al. (1965).
Тестирование интерферона. Для определения активности сывороточного ■ интерферона использовали методику подавления цитопатического действия тест-вируса (ВВС — вирус везикулярного стоматита) в культуре диплоидных клеток CV-1. Титр интерферона учитывали по его максимальному разведению, обеспечивающему сохранение клеточного монослоя в 50% лунок.
Изучение противопротозойной активности беренила и верибена проводили на 66 собаках, спонтанно инвазированных бабезиями. Возраст собак составлял 1-5 лет, интенсивность инвазии больных собак была менее 1%, от 1 до 3% и выше 3%. 33 собакам был введён беренил в дозе 3,5 мг/кг живой массы и 33 собакам - верибен в дозе 3,5 мг/кг живой массы. Эффективность препаратов учитывали по результатам исследования мазков крови, окрашенных по Романовскому, через 12, 24 и 48 часов после введения препарата и по клиническим и гематологическим признакам, характеризующим общее состояние больного животного.
Статистическую обработку полученных цифровых данных проводили общепринятыми методами вариационной статистики (Г.Ф.Лакин, 1990, Л.В.Куликов, А.А.Никишов, 1994). Степень достоверности различия между сравнительными средними величинами оценивали с помощью критерия Стьюдента. Различие между сравнительными величинами в эксперименте считалось достоверным при уровне значимости Р
2.2 Результаты собственных исследований 2.2.1 Эпизоотология бабезиоза собак в условиях Московской области
Структура заболеваемости собак бабезиозом в мегаполисе.
Анализ полученных данных позволил установить долю бабезиоза в структуре общей заболеваемости собак в условиях Московской области.
Структура заболеваемости собак в мегаполисе (п=3500). (ССС - сердечно-сосудистая система, МВС - мочееыделителъная система, ЖКТ-желудочно-кишечный тракт)
патология ССС 2%
. патология патология МВС 5% |хательной
хирургическая патология 26%
Заболеваемость собак бабезиозом регистрировали достоверно чаще, чем заболевания сердечно-сосудистой системы и дыхательного аппарата (Р<0,01).
Сезонные особенности бабезиоза собак в Московской области.
За период наблюдений с животных было снято 11785 клещей. Из снятых клещей к виду Rhipicephalns sanguineus отнесено 8013 экземпляров (67,9%), к Dermacentor marginatus — 3772 экземпляров (32,0%).
Показатели заклещеванности и заражённости собак бабезиозом
Годы Количество Количество Индекс Количество Заражённость
обследованных снятых обилия заражённых собак
животных клещей клещей бабезиозом бабезиозом,
2000 125 725 5 112 89,6
2001 240 1440 6 210 87,5
2002 359 1400 4 329 91,6
2003 480 3360 7 384 80,0
2004 534 3104 5 449 84,0
2005 460 1756 4 404 87,8
Анализ данных таблицы 1, свидетельствует об отсутствии корреляции между числом животных по индексу обилия клещей и процентом заражённых бабезиозом собак. Эпизоотический процесс при бабезиозе в период изучения характеризуется нарастающей волной и при условии отсутствия профилактических мероприятий охватывает все возрастающее количество восприимчивых животных. Массовое распространение иксодовых клещей (Rhipicephalus sanguineus и Dermacentor marginatus), являющихся переносчиками бабезиоза, постоянный контакт их с зараженными животными, наличие восприимчивых собак к заболеванию указанной болезнью и весьма благоприятные природно-климатические условия Московской области способствуют заболеванию собак бабезиозом.
Динамика заболеваемости собак бабезиозом в Московской области (1999-2005 гг.).
Экстенсивность инвазии за период 1999-2005 гг. увеличилась в 6 раз. Особенно большой всплеск экстенсивности инвазии был отмечен в весенне-летний период 2004 года. В 2005 году наблюдали уменьшение числа заболевших животных по сравнению с 2004 годом (рисунок 2).
Сезон болезни (его продолжительность, начало и конец) зависел от природно-климатических условий года и в среднем составлял 220 дней (рисунок 3). Самый ранний случай бабезиоза был зарегистрирован 1 апреля, а последний - 6 ноября в 2000 году. В 2001 году первый случай заболевания зарегистрирован 18 апреля, что характерно для более позднего наступления весны, когда температура 12-14°С установилась после 15 апреля, последний 22 октября. В 2005 году первое заболевание бабезиозом зарегистрировали 4 апреля, что обычно для начала весеннего периода, а последний - 16 ноября, позднее проявление бабезиоза связано с продолжительной тёплой осенью, когда средняя температура была 13±2°С и влажность 90%, что является благоприятными фенологическими условиями для иксодофауны.
Сезонность бабезиоза собак.
Таким образом, установлено, что массовое заражение животных происходило в конце апреля - мае (первый пик заболеваемости животных бабезиозом), что коррелировало с активностью клещей. В июле — начале августа заболеваемость снижалась до единичных случаев. Второй пик регистрировали в конце августа - сентябре. Весенняя вспышка сопровождалась максимальным количеством заболевших животных. Осенью число больных животных обычно было значительно меньше, чем весной.
Возрастные и породные особенности бабезиоза с учётом популяционного состава собак.
В Московской области наибольшее количество животных входит в возрастную группу от 1 года до 3 лет (34%), затем до 1 года (25%), от 3 до 5 лет ( 21%), наименьшее количество собак в возрастной группе от 11 до 13 лет
От числа принятых животных, больных бабезиозом наибольшее количество находится в группе от 1 до 3 лет (23 %), затем от 3 до 5 лет (19%), затем от 0 до 1 года и от 7 до 9 лет (по 16%) и наименьшее количество обратившихся было в возрасте от 11 до 13 лет (5%). При исследовании возрастного состава собак среди поступивших на приём животных установлено, что собаки старше 7 лет подвержены заболеванию бабезиозом в наибольшей степени. Наименьшая восприимчивость была выявлена у животных в возрасте до 1 года, что противоречит ранее известным материалам Е.А.Деевой (1997), С.В.Новгородцевой (1996), Т.В.Балагула (2000), согласно которым наибольшую заболеваемость отмечали у собак в возрасте от 1 года до 5 лет, а наименьшую у собак старше 10 лет.
Анализ результатов не выявил предрасположенности того или иного пола к заболеванию бабезиозом, которая в среднем была одинакова. Однако прослеживается некоторая тенденция к большей предрасположенности к
бабезиозу особей мужского пола как при расчёте на популяцию - 52 % восприимчивых самцов и 48% самок, так и по числу принятых больных бабезиозом животных - 60% самцов и 40% самок. Возможно, это связано с тем, что поголовье кобелей выше. Отношение количества самцов к количеству самок в популяции составляет приблизительно 1:1,6.
Наибольшее количество в популяции составили беспородные животные, затем немецкие овчарки, среднеазиатские и кавказские овчарки, а также ротвейлеры, наименьшее количество было зарегистрировано ньюфаундлендов, бульмастифов, русских гончих.
Из числа поступивших на приём больных животных наибольшее количество было среди беспородных, затем спаниелей, немецких овчарок и пуделей, а наименьшее среди доберманов, восточно-европейских овчарок, хаски и пекинесов.
После расчёта породной восприимчивости с учётом популяционного состава было выявлено, что наиболее чувствительны к бабезиозу собаки следующих пород: сеттеры, ньюфаундленды, колли, спаниели, шнауцеры, пудели и лайки. Наиболее устойчивыми к бабезиозу собак являются доберманы, овчарки (кавказские, восточно-европейские, немецкие и среднеазиатские) и ротвейлеры. Среднюю чувствительность к бабезиозу проявили беспородные собаки, хаски, русские гончие, болонки, лабрадоры и пекинесы.
2.2.2 Изучение морфометрических особенностей В. canis
При анализе историй болезни животных выявлена следующая интенсивность инвазии: при тяжёлой форме - более 4% (максимально 9%), при средней форме интенсивность инвазии варьировала от 1 до 4%, при лёгкой форме составила менее 1%.
Полученные данные подтверждаются материалами других авторов (B.JI. Якимова, 1930, М.В. Крылова, 1981, H.A. Казакова, 1982, ВЛ. Лебедевой, 1990).
В процессе болезни установлена связь тяжести течения заболевания собак бабезиозом с формой, размером, расположением и количеством бабезий в клетке крови (эритроците, нейтрофиле) и плазме периферической крови.
При тяжёлом течении бабезиоза в эритроцитах чаще обнаруживали несвязанные и связанные парные грушевидные формы размером 3,87±0,05*2,46±0,06мкм и 3,77±0,02х2,32±0,03мкм соответственно, а также несвязанные парные овальные бабезии со средним размером 2,3 8±0,09х 1,67±0,07мкм, в одном эритроците их количество варьировало от 2 до 6 паразитов. Бабезии обнаруживали и вне эритроцитов, в основном это были одиночные крупные грушевидные формы размером 4,11±0,03>
При средней тяжести заболевания в эритроцитах устанавливали преимущественно паразитов овальной формы средних и мелких размеров: 2,87±0,02х2,18±0,03мкм, 5±0,07*2,11±0,05мкм, а также связанные грушевидные формы со средним размером 3,89±0,04х1,98±0,08мкм
При лёгкой форме течения заболевания чаще встречали одиночные грушевидные формы паразитов размером 4,1±0,07х2,21±0,03мкм, реже мелкие округлые формы по 2-6 паразита в одном эритроците размером 2,13±0,05 х2,16±0,01мкм.
2.2.3 Факторы неспецифической резистентности
больных бабезиозом собак
При изучении факторов неспецифической резистентности были исследованы фагоцитарная активность нейтрофилов, изменение концентрации ^О и титра интерферона при бабезиозе различной тяжести.
Фагоцитарная активность нейтрофилов. Было установлено, что количество лейкоцитов у собак, больных бабезиозом, по сравнению со здоровыми животными, увеличивается по мере роста тяжести заболевания (легкая, средняя, тяжелая) соответственно на 15%, 27% и 53%. В лейкоформуле отмечается увеличение количества эозинофилов в 3, 4.3 и 5.6 раза, увеличение количества юных нейтрофилов в 11.25, 15 и 18.75 раз, палочкоядерных - в 1.6, 2.5 и 3.1 раза, моноцитов на 1.4%, 2% и 3.4%, соответственно. В тоже время, процент содержания сегментоядерных нейтрофилов снизился на 3.6%, 7.5% и 9.4%, лимфоцитов - на 4.8%, 7.8% и 12.3%, соответственно.
В итоге исследований у здоровых животных фагоцитарный индекс составил 49,85± 4,12%, а фагоцитарное число 4,3±0,6. У собак с легкой и средней тяжестью бабезиоза активность фагоцитоза повышается, соответственно, до 55,73 ±1,78% и 63,85 ±3,14%, что объясняется влиянием бабезий на развитие клеточной реакции (.Г.Р.СиеШ е1 а1., 1984, В.Л. Лебедева, 1993). Фагоцитарное число при легкой и средней тяжести заболевания возрастает до 5,2±0,9 и 6,2±1,1 ед., что связанно с увеличением активности нейтрофилов.
При тяжёлом течении бабезиоза фагоцитарный индекс снизился до 42,2±3,1 %. Снижена и способность нейтрофилов к активному захвату частиц, что проявилось в уменьшении фагоцитарного числа до 3,1±0,5 ед. Характеристикой фагоцитарной активности является и коэффициент фагоцитарного числа, величина которого отражает активность участия нейтрофилов в реакции фагоцитоза. Увеличение коэффициента фагоцитарного числа у больных животных при тяжёлом течение бабезиоза указывает на то, что при общем увеличении количества нейтрофилов в периферической крови в реакцию фагоцитоза вступает на 8,1% нейтрофилов меньше, чем у здоровых животных. При лёгкой и средней тяжести коэффициент фагоцитарного числа уменьшается, и участие нейтрофилов в реакции фагоцитоза увеличивается соответственно на 4,8 и 11,86% по сравнению со здоровыми животными.
Таким образом, тяжесть течения болезни во многом определяет изменения фагоцитарной активности. Так, в отличие от лёгкой и средней степени течения заболевания, когда фагоцитарная активность возрастает, в ответ на внедрение бабезий при тяжёлой форме отмечается снижение фагоцитарного числа и фагоцитарного индекса.
Показатели (г/л) у здоровых, больных и переболевших животных (п=89).
Здоровые Больные Переболевшие
У здоровых собак титр интерферона составил 1:2 и 1:4. У больных бабезиозом собак титр интерферона был 1:4. Таким образом, титры интерферона в сыворотке крови здоровых и больных собак не имеют существенных различий.
2.2.4 Изменение гематологических и биохимических показателей крови и мочи при разной тяжести бабезиоза Гематологические показатели. При тяжёлой форме бабезиоза отмечено, что свёртывание крови замедлено, сыворотка красного цвета. При отстаивании крови эритроциты выпадали в осадок тёмно-фиолетового цвета, высота которого достигает 1/5-1/10 высоты уровня плазмы.
В начале заболевания количество эритроцитов составляло 3,5-4х1012/л, но в последующем изменение было более резким ( количество эритроцитов уменьшилось на 53% и составило 2,26-2,8х1012/л). Отмечали анизо- и пойкилоцитоз, а также гипохромазию эритроцитов (эритроциты бледно-розового цвета, напоминали кольца с выраженным центральным просветом), в них наблюдали внутриэритроцитарные включения (тельца Жолли). Количество гемоглобина снизилось с 130-140 г/л до 60-70 г/л. Число лейкоцитов увеличилось в 2-3 раза и составило 16-17х109/л за счёт увеличения палочкоядерных, юных и лимфоцитов, то есть имеет место сдвиг ядра влево. У больных животных отмечена эозинофилия. Количество эозинофилов в крови больных животных увеличилось до 3,75±0,5 %, число лимфоцитов до 19,0±2,5%, палочкоядерных стало больше в два раза, а количество сегментоядерных и моноцитов повысилось незначительно (рисунок 4,5).
Рисунок 4. Динамика изменения концентрации Рисунок 5. Изменение гематологических
показателей гемоглобина (г/л) при бабезиозе собак. показателей при бабезиозе собак.
При средней и лёгкой степени тяжести наблюдали те же изменения, но менее ярко выраженные. При лёгком течении выявлено незначительное снижение гемоглобина. Количество эритроцитов вначале болезни снижалось, но через 2-3 недели начинало возрастать, постепенно приближаясь к нормальным показателям. Количество лейкоцитов было увеличено до 18-19x109/л. При средней форме тяжести заболевания были ярко выражены качественные изменения форменных элементов крови: диаметр эритроцитов увеличивался в 1,5 (анизоцитоз), что свидетельствует об усилении функции красного костного мозга, как защитной функции организма. Окраска эритроцитов менее интенсивна (гипохромазия), реже отмечали гиперхромазию эритроцитов и пойкилоцитоз.
Таким образом, токсическое действие бабезий на организм собак сопровождается эритроцитопенией, снижением гемоглобина, лимфоцитозом, увеличением палочкоядерных нейтрофилов. Гипохромазия эритроцитов свидетельствует о низком содержании гемоглобина в эритроците, что типично для железодефицитной анемии.
Анализ полученных данных указывает на необходимость комплексного лечения в сочетании с дачей полноценных по содержанию витаминов, микро-и макроэлементов кормов, а также введения в корм витаминов А, Д, Е и витамины группы В. Наши данные подтверждают исследования других авторов (P.A.Basson, J.G.Pienaar, 1965, С.В.Новгородцевой, 1999, Е.А. Юровой, 2001, P.Conrad, J.Thomford et al., 2001).
Биохимические изменения крови. Анализ проведённых нами биохимических исследований позволил выявить количественные изменения некоторых биохимических показателей.
Так, при тяжёлом течении бабезиоза у 14% собак отмечено повышение холестерина до 7,6±1,1ммоль/л, у 64% собак увеличение мочевины до 27,3±1,1ммоль/л, у 85 % собак повышение креатинина до 128,5±2,2 мкмоль/л, у 92% увеличение ACT до 114±2,6 МЕ/л и у 85 % повышение АЛТ до 130±4,9 МЕ/л. Значительного увеличения общего белка не наблюдали, уровень глюкозы увеличен был незначительно. У всех собак этой группы была повышена концентрация билирубина до 37,95±2,2 мкмоль/л.
В группе с лёгким и средним течением болезни уровни холестерина, глюкозы, остаточного азота, мочевины, креатинина и АСТ были в пределах нормы. Но при средней тяжести у 16,2% собак был увеличен до 68,3±1,1 г/л общий белок, у 54% собак отмечено увеличение активности АЛТ до 65,3±1,8 МЕ/л. В обеих группах у всех собак была повышена концентрация билирубина до 17,4±1,1 и 27,25±1,1 мкмоль/л соответственно.
Таким образом, бабезиоз собак сопровождается серьёзным нарушением функций паренхиматозных органов.
Показатели мочи. При обследовании 89 животных, в моче больных, выявлены следующие изменения: при тяжёлой и средней тяжести болезни у 94% собак цвет мочи варьировал от кирпично-красного до тёмно-жёлтого, у 17,6% появилась мутность и у 21,5% рН мочи был равен 4±0,5. При бабезиозе лёгкой степени изменение цвета мочи наблюдали у 42,8% собак, появления мутности мочи у 17,8% и закисление у 50% животных.
Белок в моче обнаружили у 45% собак с тяжёлой и средней формой болезни и у 35% с лёгкой степенью. Увеличение количества уробилиногена в первом случае выявлено у 5,8%, глюкозурия у 25,4%, билирубинурия у 80,3% и гемоглобинурия у 100% собак, причём у 39,2% собак наблюдали микрогемоглобинуршо и у 60,8% макрогемоглобинурию. У животных с лёгкой степенью заболевания уробилиноген в моче не обнаружили, глюкозурия отмечена у 21,4%, кетонурия у 3,5%, билирубинурия у 67,8%, гемоглобинурия у 71%, микрогемоглобинурия у 40% и макрогемоглобипурия у 31%.
Необходимо отметить, что при быстрой и значительной потере белка с мочой уменьшается объём циркулирующей плазмы, в результате происходит задержка натрия, и как следствие развиваются отёки и артериальная гипертензия. Обнаружение в моче в большом количестве билирубина (билирубинурия) и уробилиногена (уробилиногенурия) наблюдается в результате гемолиза эритроцитов, лихорадки и нарушении функции печени. Обнаружение в моче ацетона, бета-оксимаслянной кислоты, ацетоуксусной кислоты является результатом лихорадки и почечной глюкозурии.
Таким образом, данные, полученные при исследовании мочи, подтверждают предыдущие выводы о развитии серьёзной патологии при бабезиозе собак.
2.2.5 Эффективность лечения бабезиоза беренилом и вернбсном
Для лечения собак больных бабезиозом были использованы 2 препарата.
Беренил применяли в виде водного раствора в дозе 3,5 мг/кг массы тела животного. Предварительно препарат растворяли в дистиллированной воде из расчета 25 мл дистиллированной воды на 2,36 г препарата. Раствор вводили внутримышечно из расчёта 1 мл/10кг массы тела животного.
Вернбен также предварительно растворяли в дистиллированной воде и применяли в дозе 3,5 мг/кг. Содержимое одного пакета (2,36 г) растворяли в 25 мл дистиллированной воды. Полученный раствор вводили внутримышечно из расчета 1 мл на 10 кг массы тела животного.
Эффективность применения беренила и верибена при лечении бабезиоза собак.
Препарат Доза препарата Количество больных животных Эффективность, %
Через 12 часов Через 24 часа Через 48 часов
Беренил 3,5 мг/кг живой массы п=33 72,7 78,7 81,8
Верибен 3,5мг/кг живой массы п=33 87,5 90,6 98
Различия в эффективности двух изучаемых препаратов достоверны при р
В результате проведённых опытов отмечено, что при интенсивности инвазии менее 1% возбудитель исчезал из крови больного животного через 12 часов после применения обоих препаратов (эффективность 100%). При интенсивности инвазии от 1 до 3% через 12 часов в крови у 9,3% больных животных при инъекции верибена паразитемия составляла 0,4%, при применении беренила у 5,5% больных собак - 0,2%. При применении верибена, при интенсивности инвазии более 3%, у 18% больных собак через 12 часов паразитемия была равна 1,2% и у 7% после применения беренила -0,6%. В целом, эффективность беренила через 12 часов после введения составила 72,7%, а верибена 87,5%. Через 24 часа после применения препаратов, эффективность беренила и верибена возросла на 6% и 3,1% соответственно (таблица 2). Через 48 часов у 81,1% больных животных после введения беренила и у 98% после назначения верибена состояние стало удовлетворительным, симптомы болезни ослабевали: восстановился аппетит, температура тела снизилась до нормы, уменьшилась желтушность слизистых, исчезла макрогемоглобинурия, отмечено увеличение эритроцитов в среднем до 3,85±0,35 х1012/л и гемоглобина до 85±15 г/л.
Таким образом, эффективность верибена через 48 часов составила 98%, а беренила-81,8%.
По нашим наблюдениям, после применения верибена и беренила имеет место нарушение функций печени и почек, тяжелые поражения нервной системы, особенно у колли, бобтейлов, шелти и шарпеев. Поэтому наряду с этиотрошюй терапией возникла целесообразность включения в схему лечения препаратов патогенетической и симптоматической терапии, характер применения обуславливали развитием осложнений и степени их выраженности. С целью их профилактики осуществлялась инфузионная терапия объёмозамещающими (полиоксидин, реополиглюкин) и базисными (раствор Рингера, лактосоль) растворами с применением диуретиков в течение 2-3 суток. Для предотвращения развития инфекционно-токсического шока (падение артериального давления, резкая тахикардия, одышка, прекращение мочеотделения, развитие синдрома дессиминированного внутрисосудистого свертывания) дополнительно проводили патогенетическую терапию, которая
заключалась во внутривенном введении преднизолона в дозе 30-120 мг или дексаметазона, подкожного или внутривенного назначения антиферментных препаратов типа «Контрикал» в дозе от 10000 до 200000 Ед. С целью улучшения микроциркуляции и понижения агрегации тромбоцитов применяли трентал в дозе 30-50мг, добавляя его в инфузионный раствор. Для нормализации сердечной деятельности вводили подкожно 1-2 мл 10% сульфокамфокаина. С целью снятия спазмов гладкой мускулатуры использовали препараты баралгин, максиган, спазган. В каждом случае лечения для предупреждения аллергических осложнений проводили десенсибилизирующую терапию антигистаминными препаратами.
После снятия основных проявлений острой полифункциональной недостаточности органов назначали поливитаминную терапию. Курс витаминотерапии составлял 14-20 дней. Наряду с витаминотерапией применяли железосодержащие препараты типа ферроплекс, гемостимулин, феррум — лек.
В виду того, что бабезиоз вызывает в организме собак развитие таких патологических процессов, как анемия, нарушение сердечно-сосудистой и дыхательной деятельности, ослабление функции печени, почек и селезенки, переболевшим животным необходим реабилитационный период. Реабилитационный период заключается в ограничении физических нагрузок, изменении диеты животного за счёт уменьшения жира и белка и увеличения углеводов. Животным, переболевшим бабезиозом в тяжёлой форме, назначали эссенциале внутривенно в течении 5-10 дней с последующим переходом на пероральную дачу эссенциале в капсулах или карсила (гепатопротектора, улучшающего обменные процессы в печени и способствующего улучшению пищеварения) в течении месяца в сочетании с внутримышечными инъекциями витаминов В12, В(, Вб в течении 10 дней. Животным, переболевшим в лёгкой форме, назначали курс эссенциале в капсулах перорально в течение месяца или карсил в сочетании с витаминами группы В.
Такое комплексное лечение позволило снизить количество летальных случаев на 20% и тяжёлых осложнений на 40%.
1. Бабезиоз собак занимает одну из ведущих позиций в структуре общей заболеваемости собак и имеет тенденцию к увеличению экстенсивности инвазии. Зарегистрировано 2 сезонных пика заболеваемости собак бабезиозом. Максимальный с середины апреля до середины июня и менее выраженный - с середины августа до конца сентября.
2. Иксодофауна Московской области представлена двумя видами клещей: Rhipicephalus sanguineus и Dermacentor marginatus. По данным многолетних наблюдений, индекс обилия весной и осенью составлял 4-7 клещей.
3. С возрастом восприимчивость собак к бабезиозу увеличивается. Самая высокая заболеваемость наблюдается у собак старше 7 лет, наименьшая
- в возрасте до 1 года. Наиболее чувствительны к бабезиозу собаки пород сеттеры, ньюфаундленды, колли, спаниели, шнауцеры, пудели и лайки. Наиболее устойчивы доберманы, овчарки (кавказские, восточноевропейские, немецкие и среднеазиатские) и ротвейлеры.
4. Бабезиоз у собак протекает в 3-х формах: при лёгком переболевании -паразитемия менее 1%, при среднем - 1-4%, при тяжёлом - более 4%. Размеры и формы бабезий имели свои особенности в зависимости от тяжести заболевания.
5. Выраженность показателей неспецифической резистентности (фагоцитарная активность, фагоцитарный индекс, коэффициент фагоцитарного числа) коррелирует с формой переболевания. При тяжёлой форме наблюдали снижение фагоцитарного числа и индекса и увеличение IgG и коэффициента фагоцитарного числа. При лёгком и среднем течении отмечали возрастание фагоцитарной активности и снижение коэффициента фагоцитарного числа. Уровень интерферона в зависимости от формы течения заболевания не изменялся.
6. С повышением интенсивности инвазии собак В. canis, возрастает степень патологических явлений в организме собак, что находит отражение в изменении гематологических и биохимических показателей крови и мочи.
7. Лечебная эффективность беренила и верибена при их парентеральном введении собакам больных бабезиозом соответственно составляла через 12, 24 и 48 часов 72.7-87.5%, 78.7-90.6%, 81.8-98% при лучшей переносимости верибена.
8. При проведении реабилитационной терапии у собак получены хорошие результаты от применения объёмозамещающих средств: полиоксидина и реополиглюкина, а также преднизолона, дексаметазона и трентала.
4. Рекомендации по использованию научных выводов
1. В связи с заклещеванием изучаемого региона необходимо тщательно осматривать собак на предмет обнаружения клещей после выгула их в лесопарковых зонах.
2. С целью более раннего выявления возможных осложнений бабезиоза, лечение следует проводить с обязательным контролем гематологических и биохимических показателей крови и мочи больного животного. Лабораторные исследования следует проводить как в период лечения, так и в течение последующего реабилитационного периода.
3. Лечение собак при бабезиозе должно носить комплексный характер, включая, помимо специфической противопаразитарной терапии, патогенетическую, симптоматическую и иммуностимулирующую терапию. В реабилитационный период необходимо животному назначать диетотерапию, ограничивать физические нагрузки.
5. СПИСОК ОПУБЛИКОВАННЫХ РАБОТ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ.
1. Кошелева М.И., Олейников С.Н., Молчанов И.А. Эпизоотическая ситуация по бабезиозу собак в г. Москве и Московской области. Вестник Российского Университета дружбы народов. Серия сельскохозяйственные науки, животноводство, 2001,6,91-93.
2. Кошелева М.И., Кудимова О.В., Молчанов И.А. и др. К эпизоотологии бабезиоза собак в Москве и Московской области. Вестник ветеринарии, 24, 3/2002, Международная паразитологическая конференция, ВИЭВ, Москва, 2002,32-33.
3. Кошелева М.И., Олейников С.Н., Молчанов И.А. и др. Новые аспекты в эпизоотологии бабезиоза собак в Московской области. Вестник ветеринарной медицины, 1 (12), 2004,21-22.
4. Кошелева М.И., Олейников С.Н., Молчанов И.А. и др. Популяционная эпизоотология бабезиоза собак в Московской области. Ветеринария, 4, 2004,51-53.
5. Кошелева М.И., Олейников С.Н., Молчанов И.А и др. Фагоцитарная активность нейтрофилов и морфометрия бабезий у собак. Ветеринария, 3,2005,33-36.
6. Кошелева М.И. Бабезиоз собак: эпизоотология заболевания, морфометрия паразита, фагоцитарная активность нейтрофилов в зависимости от тяжести течения инвазии. Ветеринарная патология, №3(18), 2006,31-37.
Кошелева Марина Игоревна (Россия) Бабезиоз собак в условиях Московской области (эпизоотология, иммунитет, терапия).
Работа посвящена изучению вопросов эпизоотологии бабезиоза собак, сезонной, возрастной и породной динамике заражения собак В. саше с учётом популяционных особенностей. Изучены морфометрические особенности В. сагш при разной степени тяжести заболевания собак бабезиозом. В результате проведённых исследований изучены гематологические й биохимические изменения крови и фагоцитарная активность нейтрофилов в зависимости от тяжести течения, а также концентрации и титра интерферона больных и переболевших животных. Проведено сравнительное изучение эффективности верибена и беренила при разной степени тяжести заболевания собак бабезиозом.
Marina I. Kosheleva (Russia) Babesiosis of dogs in the condition of Moscow region (epizootology, immunity,
This work is dedicated to the study of the epizootological situation on babesiosis of dogs, seasonal, age and breed dynamics of the dog's contamination of B. canis, regarding the population peculiarities. Morphometric peculiarities of B. canis were studied taking into the severity of disease. As a result of the carried spent research hematology, biochemical changes and phagocytosis rate parameters were studied in blood of dog suffering from the different severity of babesiosis. The concentration of IgG and titer of interferon were determined in the serum of sick dogs. We realizated the comparative study of effectiveness of veriben and berenil in depending of the severity disease.
Отпечатано в ООО «Оргсервис—2000» Подписано в печать 10.11.06 Объем 1,00 пл. Формат 60x90/16. Тираж 100 экз. Заказ № 10/11—1т 115419, Москва, ул. Орджоникидзе, 3
"
